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高效毛细管电泳仪与高效液相色谱仪比较——比对仪
编辑:商辉自动化设备(上海)有限公司  时间:2016-09-26

高效毛细管电泳仪与高效液相色谱仪比较

高效毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪(HPLC)之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。HPCE与HPLC比较如下:

一、相同点:

1、检测器:

HPCE和HPLC均可采用紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。但由于HPCE采用在柱检测,光路短,灵敏度和线性范围都不如HPLC。

2、定性和定量方法:

HPCE的定性和定量方法与HPLC相同,采用出峰时间定性,峰面积或峰高定量。

3、柱效和分辨率:

HPCE的柱效和分辨率计算方法与HPLC相同。

二、不同点:

1、分离原理:

(1)HPCE:基于组分在载体电解质中迁移速度的不同。

(2)HPLC:基于组分在固定相和流动相之间分配系数的不同。

2、分离模式:

(1)HPCE:毛细管区带电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳和毛细管等速电泳等。

(2)HPLC:正相色谱、反相色谱、离子交换色谱和凝胶色谱等。

3、分离柱:

(1)HPCE:小内径毛细管柱内装不同载体电解质。

(2)HPLC:小内径毛细管柱内装不同固定相。

4、进样方式:

(1)HPCE:电动进样、压力进样和扩散进样。

(2)HPLC:微量注射器进样、六通阀进样和自动进样器进样。

5、进样体积:

(1)HPCE:纳升级。

(2)HPLC:微升级。

6、溶质驱动方式:

(1)HPCE:以高压直流电场为驱动力。

(2)HPLC:以高压输液泵驱动流动相。

7、采用毛细管的目的:

(1)HPCE:有效散热,使径向温度梯度更小。

(2)HPLC:消除涡流扩散,缩短组分在流动相中的传质过程。

8、柱效:

(1)HPCE:72万TP/m,大分子更大,尤其生物大分子可达3000万TP/m,能检测到单细胞和单分子水平。

(2)HPLC:一般为25TP/m,大分子更小。

9、柱价:

(1)HPCE:柱价低,

(2)HPLC:柱价高,且易沾污,易失效。

10、分离液:

(1)HPCE:在水溶液介质中进行,不污染环境。

(2)HPLC:常在含有机溶剂(如甲醇等)介质中进行,易造成环境污染。


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